К СБОРНИКУ МАТЕРИАЛОВ
Козлов Л.Б.
К ВОПРОСУ ОБ ЭТИОЛОГИИ ПРОГРЕДИЕНТНЫХ ФОРМ КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА
Тюменская государственная медицинская академия, Тюмень
В бывшем СССР прогредиентные формы клещевого энцефалита (КЭ) возникают в различных природных очагах с частотой от 1 до 8%. Длительность прогредиентного течения КЭ составляет от 1 до 20 лет и более. В 17% прогредиентные формы заканчивались летальным исходом в сроки от 9 до 20 лет (Уманский К.Г., 1977).
По характеру течения инфекционного процесса прогредиентные формы можно отнести к медленным инфекциям. Впервые мнение о длительной персистенции вируса КЭ в центральной нервной системе (ЦНС) у больных с синдромом кожевниковской эпилепсии высказал М.П.Чумаков с соавторами (1944). В экспериментах на лабораторных животных были подтверждены данные о длительной персистенции вирусов КЭ в тканях ЦНС теплокровных животных. Выявлены характерные патоморфологические поражения мозговой ткани, вызванные вирусом КЭ. Специфичность поражений ЦНС была подтверждена методом флюоресцирующих антител, и из пораженной мозговой ткани был выделен вирус КЭ (Фролова Т.В. с соавт.,1987).
Ряд исследователей считают, что патология нейроглии имеет вторичный характер (Робинзон И.А.,1963 и др.). Однако, по мнению В. М. Жданова (!975), бессимптомная персистенция вируса, при которой не происходит вирусологически доказанной репродукции возбудителя может быть связана либо с интеграцией вирусной РНК с геномом клетки, либо с существованием вируса в дефектной форме.
Б.А. Ерман с соавт.(1996) отметили, что в лимфоцитах, инфицированных вирусом КЭ, наблюдались деструктивные изменения не связанные с репродукцией вируса, а исходили от инфицированных ретикулярных и макрофагальных клеток.
Геном вируса КЭ состоит из плюс нитевой РНК, которая обладает свойствами иРНК. Поэтому в клетке синтез капсида вирусных частиц может происходить без репликации вирусной РНК. Капсид вируса имеет кубический тип симметрии. При таком типе укладки белков капсида и при недостатке в клетке вирусной нуклеиновой кислоты создаются оптимальные условия для формирования дефектных вирусных частиц (лишенных вирусной нуклеиновой кислоты). Кроме того, при наличии в зараженной клетке обратной транскриптазы, может происходить процесс интеграции генома вируса в геном клетки.
О циркуляции в природных очагах КЭ неоднородных вирусных популяции известно давно (Дубов А.В. с соавт., 1965 - 1980). Вирусы, которые выделялись из природных очагов КЭ, обладали различной нейротропной, висцеротропной, антигенной и иммуногенной активностью. В очагах КЭ в условиях меняющихся компонентов биологической среды происходит отбор субпопуляций вируса, адаптированных к различным тканевым структурам организмов (многочисленных прокормителей иксодовых клещей). Формируются популяции вирусов КЭ с различными генетическими свойствами. Из природного очага КЭ выделен штамм Исетск-26 СобФЭК50, который утратил висцеротропную и антигенную активность. Заражение мозговой ткани беспородных белых мышей популяции Rap 4 - 5 недельного возраста вызывало накопление вируса в количестве 7,5 + 0,1 lg ЛД50/мл, а при подкожном введении вируса гибели мышей не отмечалось. Иммуногенная активность выделенной популяции составила 2,1 lg. В результате дальнейшей селекции штамма И-26 Соб ФЭК 50 получен вариант вируса И-26 Соб ФЭК 71, который снизил иммуногенную активность до 1,3 lg, а в сыворотках крови иммунизированных животных антигемагглютинирующие антитела к вирусу КЭ не определялись. Как известно, вирусы КЭ обладают висцеротропной и нейротропной активностью. Иммуногенная активность вирусов связана, в основном, с висцеротропной активностью.
Высоковирулентный штамм Абсеттаров вируса КЭ обладал высокой нейротропной и висцеротропной активностью. Интрацеребральное заражение беспородных белых мышей вызывало накопление вируса в количестве до 9,0 + 0,2 lg ЛД50/мл, а подкожное - до 8,2 + 0,3 lg ЛД50/мл. Индекс инвазивности составил 0,8 + 0,3 lg. Естественно ослабленный штамм Еланцев (клон 15-20/3) вируса комплекса КЭ имел следующие показатели инфекционной активности: 6,8 + 0,1 lg ЛД50/мл, 2,0 + 0,1 lg ЛД50/мл и 4,8 + 0,1 lg соответственно. В зависимости от методов селекции и адаптации вируса к различным тканям организма выделены вирусные порпуляции, обладающие различными биологическими свойствами. При интрацеребральном заражении титр вируса колебался от 3,б + 0,3 до 8,3 + 0,4 lg ЛД50/мл, а при подкожном - от 3,2 + 0,8 до 1,2 + 0,1 lg ЛД50/мл.
В работах Е.К. Пресмана с соавт.(1997) установлено, что вирулентные и персистирующие штаммы вирусов КЭ обладают различной антигенной структурой. Используя электрофорез, иммуноблоттинг и детекцию выделенных антигенов в реакции ИФА с помощью моноклональных антител (МКА), авторы установили, что персистирующие вирусы КЭ имели широкий спектр вариабельности молекулярной массы структурных и неструктурных вирусных белков.
Молекулярная масса белка NS1 составила 48 - 50 kD, гликопротеида Е - 55 -57 kD, NS3 - 65 -68 kD, а неструктурный белок NS5 обладал высоким уровнем лабильности. В иммуноблоттинге выявлено несколько антигенных полос с молекулярной массой 90, 65 и иногда 45 kD. Из природного очага КЭ выделен персистирующий штамм Заусаев вируса КЭ с изменённой антигенной структурой. Гликопротеид Е вируса имел низкую молекулярную массу, равную 36 - 40 kD, а неструктурные белки NS1 и NS3 вируса КЭ не определялись с помощью моноклональных антител.
Следует отметить, что молекулярная масса гликопротеида Е штамма Заусаев вируса КЭ приближалась к молекулярной массе прионов. Прионы имеют молекулярную массу 33 - 35 kD. Известно, что прионы, подобно образованию структур цитоскелета, способны к копированию белковой конформации (Инге-Вечтомов С.Г., 2000).
Таким образом, очевидно, на развитие прогредиентных форм КЭ влияет несколько факторов: особенности репродукции вируса, формирование дефектных вирусных частиц, интеграция генома вируса с геномом клетки (при наличии в клетке обратной транскриптазы) с последующей репродукцией вирусного белка, матричные процессы в клетке по копированию конформации вирусного белка, снижение висцеротропной и иммуногенной активности вирусов. Не исключено также, что некоторые штаммы персистирующих вирусов КЭ занимают промежуточное положение между прионами и вирусами.