Существует единственный способ выявления перфторорганических соединений (ПФОС) в образцах биологических тканей: обнаружение ПФОС в крови и тканях с помощью газохроматографического метода (Yamanouchi K., Murashima R., Yokoyama K., 1975). Газохроматографический метод труден в выполнении, требует дорогостоящей аппаратуры и длителен по времени.
Способ окраски перфторана в тканях не существует, соответственно аналогов и прототипов нет.
Целью работы является разработка способа окраски перфторана для его выявления в биологических тканях и жидкостях.
Для окраски можно использовать любой биологический материал (мазки крови, жидкости серозных полостей, мазки - отпечатки органов и тканей, замороженные срезы органов и тканей).
Методика окраски.
Мазок или срез ткани сушат при комнатной температуре с частичной кратковременной фиксацией жаром (над горелкой спиртовки).
На предметное стекло с мазком или замороженным срезом ткани на 10 мин. наносят 5% спиртовый раствор йода (официнальная аптечная расфасовка).
Сливают йодный раствор, просушивают фильтровальной бумагой и погружают предметное стекло в дистиллированную воду (2 порции).
Быстро ополаскивают в 96 градусном этиловом спирте (можно использовать спирт для нескольких препаратов, т.е. повторно), погружают в дистиллированную воду. Ополаскивание в спирте при необходимости можно повторить.
На предметное стекло наносят 1% водный раствор эозина на 1-2 мин.
Сливают эозин и препарат погружают в дистиллированную воду
(в 3 порции по 1-2 мин).
Подсушивают на воздухе и заключают в глицерин.
Результат окрашивания.
Частицы эмульсии перфторана окрашиваются в сиренево-фиолетовый цвет с черно-фиолетовым ободком и определяются под микроскопом в цитоплазме клеток (макрофагов), на поверхности некоторых клеток (особенно эритроцитов), плазме крови и тканевой жидкости.
Эозин используется для выявления клеток с целью контрастирования и распознавания локализации окрашенных частиц эмульсии в структурах органа. Препараты необходимо хранить в темном месте при комнатной температуре. Окраска сохраняется более 1 недели.
По предлагаемой методике изготовлено более 350 препаратов (мазков, мазков-отпечатков, замороженных срезов) брыжеечных лимфатических узлов, печени, селезенки, легких, почки на кафедрах анатомии человека и патологической анатомии Дагестанской государственной медицинской академии.
Предлагаемый способ позволяет определять присутствие перфторана в биологических тканях и средах. Он прост в выполнении, не требует дорогих реактивов и является пока единственным для выявления перфторана в тканях и биологических жидкостях методом его окраски. На способ получена приоритетная справка © 2001106753/14(006896) от 12.03.2001 г.
Страница