Мембранопротективное действие перфторана на эритроциты здоровых и больных наследственными мембранопатиями

С целью изучения возможного влияния перфторана (ПФУ) на эритроциты периферической крови здоровых и больных различными формами наследственных мембранопатий эритроцитов (микросфероцитоз и овалоцитоз эритроцитов) проводилось исследование in vitro. Венозная кровь здоровых (n=3) и больных (наследственный сфероцитоз n=3; наследственный овалоцитоз n=2) собиралась в вакутейнеры с гепарином и ЭДТА по 3,5 мл в каждый и инкубировалась при 37⁰С в течение 24 часов. Первая пара вакутейнеров инкубировалась без добавления ПФУ, вторая - с добавлением 0,25 мл ПФУ, третья - с добавлением 0,5 мл ПФУ. Через 0, 4 и 24 часа из каждого вакутейнера производился забор содержимого на исследование: общего анализа крови на автоматическом гематологическом анализаторе "Contraves Digicell-800", осмотической резистентности, морфометрический анализ с оценкой степени деградации эритроцитов.

Инкубирование образцов крови с 0,25 мл ПФУ в течение 24 часов приводило к менее выраженным изменениям объема эритроцитов, по сравнению с другими образцами (без ПФУ и с 0,5 мл ПФУ): у здоровых доноров объем эритроцитов увеличился на 7‑8 фл (10-12 фл и 7-8 фл соответственно), у больных наследственным сфероцитозом - на 5,8-6,8 фл (10-12 фл и 9,2-14 фл соответственно) и у больных наследственным овалоцитозом - 5,5-8,6 фл (10,8-14,4 фл и 9,8-11,2 фл соответственно). Полученные данные свидетельствуют о том, что ПФУ препятствует набуханию эритроцитов. Количество деградированных форм эритроцитов через 24 часа инкубации было в 1,5 раза меньше в образцах, инкубировавшихся с ПФУ. При исследовании осмотической резистентности эритроцитов после инкубации в течение 24 часов отмечалось уменьшение процента гемолиза в 0,85% растворе хлорида натрия в 1,56 раза после добавления 0,25 мл ПФУ у больных наследственным сфероцитозом (без ПФУ гемолиз составил 10,7-25%, с 0,25 мл ПФУ - 7,6-14,6%, с 0,5 мл ПФУ - 5,6-24,3%), у больных наследственным овалоцитозом в 1,48 раз (без ПФУ - 10,0-15,8%, с 0,25 мл ПФУ - 6,8-10,7%, с 0,5 мл ПФУ - 2,3-5,7%); в норме при 0,85% хлорида натрия гемолиз эритроцитов не происходит. Увеличение дозы ПФУ в инкубируемом образце крови не всегда приводило к дальнейшему улучшению показателей, иногда отмечалось отсутствие динамики.

Заключение: проведенное пилотное исследование показало наличие некоторого мембранопротективного эффекта малых доз перфторана, причем этот эффект был более выражен у больных наследственным микросфероцитозом. Для получения статистически достоверных данных требуется продолжить исследование.

Список литературы